nifH作用遗传基因可在编码序列高宽比基因变异的基因中存有于多复制中，据报道巴氏杆菌有6个不一样的非同一复制，多肽链编码序列同源性在68-99%中间。实际上，虽然ASV-12与C.pasteurianumX07474参照编码序列聚在一起，但它仅有90%的多肽链编码序列同源性。
图6.高C:N管式反应器的nifH-ASVs（以深灰色突显）的系统发育树以及近期评定的参照编码序列。Bootstrap值1000，比例尺精度表明编码序列分异间距。
探讨
管式反应器在沒有一切加上外地人氮源的状况下运作，能够 造成含有自生固氮病菌生物质燃料，并将废水治理到与加上氮的管式反应器同样的规范，并相信氮来源于气体，而不是来源于收购的生物质燃料，由于在管式反应器的污水中基本上沒有发觉铵或空气氧化氮化合物。早已证实自生固氮病菌可以提升绿色植物（如谷类和甘庶）的氮消化吸收，因而这类种类的淤泥能够 作为生物有机肥。除此之外，一些自生固氮病菌能够 在一些非豆类植物上开展定殖，并产生推动植物的生长和生产量的相互依存。废水治理淤泥的元素组成可做为事后科学研究的主题风格，以评定其做为生物有机肥的可接受性。
与传统式的氮复原废水治理系统软件对比，污水中微生物菌种开展固氮的对策是可持续性的，运作成本费更低；它不用附加加上氨，而且在低溶氧浓度值（低于0.5mgO2/L）下运作。一般状况下较低的溶氧浓度值被觉得有益于自生固氮病菌生长发育，并显著降低运作成本费（占活性污泥法厂耗电量的70%之上）。水力发电等待时间和淤泥等待时间对自身固氮病菌挑选的危害并未表明，应进一步科学研究以提升其繁育。创作者在试验中观查到固氮率（11.8米gN/L/d）与管式反应器中的基础理论固氮量（9.8mg/L/d）和别的开创性固氮技术性中的汇报非常。比如在无机化合物生物固氮混种系统软件中，运用黄链球菌自繁的纯塑造物和根据催化反应水裂化（运用可再生资源）得到 氢，得到 了每日45512mgN的固氮率。殊不知，这一全过程的较高速传输必须考虑到金属催化剂的成本费和可靠性及其维持纯塑造物的艰难。
乙炔气体复原率与N2固定不动率之比称之为R比，尽管R比的标准偏差是3.2，但它的转变范畴是1到30。因而，出外推数据信息以得到 生物固氮的预测值以前，用15N2法校正乙炔气体还原法是十分关键的。过去在废水治理系统软件中点评固氮的工作中，仅用乙炔气体还原法估计固氮率。运用nifH遗传基因对病菌开展归类具备趣味性，由于nifH遗传基因能够 水准迁移，因而其系统发育与16SrRNA遗传基因系统发育的一致性较弱，并且因为其內部存有好几个不一样的nifH复制，促使归类更为繁杂。
据统计，全世界造纸工业和造纸工业生产每一年造成的污水量最少为39.01亿升，因而这种高碳钢氮污水每一年可出示最少91.38吨氮的固定电力能源，这一总数仅等于每一年用Haber-Bosch法固定不动的一小部分，殊不知这类新的固氮对策可用以高C:N的状况，比如来源于别的行业的污水，如酿酒厂等。针对没钱买有机肥的发达国家的农户看起来十分关键，管式反应器中nifH与假设病菌数量的比例比Bowers等报导的比例低10倍，这将会受试验标准（污水成份、水力发电等待时间、溶氧水准等）的驱动器，但也将会遭受统计分析方法的危害，如DNA获取，引物挑选等。
评价
在此项工作上，创作者展现了在高碳氮比自然环境下运作的废水治理系统软件不在危害解决高效率的状况下固定不动比较丰厚氮量的工作能力，并证实了一种新的固氮对策，不重视土壤含水量提升的中氮污水做为污水淤泥的升值方式。哈伯法（HaberBoschprocess）固氮加工工艺比生物固氮的动能高效率2至4.5倍，殊不知，必须留意的是一些不比较发达地域生产主力水准比较有限，而且不科学使用化用现阶段已导致的一系列环境污染问题。氮的挑戰包含有机肥合理运用来确保粮食生产安全，另外缓解废水治理系统软件中的残留淤泥的环境污染危害，含有自生固氮病菌有利于将高碳钢氮废水治理系统软件做为一种潜在性的基肥来源于。总而言之，生物科技的开发设计为减轻依靠化石能源出示电力能源的加工工艺固定不动氮的出示了一种自主创新的可持续性方式。
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